ИЗУЧЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ Т- и В-ЛИМФОЦИТОВ

У БОЛЬНЫХ С H. PYLORI – АССОЦИИРОВАННОЙ

ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ В ДИНАМИКЕ

ЗАБОЛЕВАНИЯ НА ФОНЕ КВЧ-ТЕРАПИИ

А. А. Бокарев, Е. И. Ефимов, Е. А. Аистова, Е. В. Денисова, С. В. Ермолин

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И. Н. Блохиной

Нижний Новгород

Вестник Нижегородского университета им. Лобачевского. Серия Биология. Выпуск 1(6). Электромагнитные поля и излучения в биологии и медицине. Н.Новгород: Изд-во ННГУ, 2003. С.172-175.

В работе приведены результаты исследований с помощью метода люминолзависимой хемилюминисценции функциональной активности иммунокомпетентных клеток в крови больных язвенной болезнью желудка и 12-перстной кишки, в гастродуоденальных биоптатах которых выявлен Н. pylori. Показана положительная динамика данного показателя на фоне комплексного лечения с использованием миллиметровых волн в режиме КВЧ-пунктуры.

ВВЕДЕНИЕ

В патогенезе эрозивно-язвенных поражений желудка и 12-перстной кишки, ассоциированных с геликобактерной инфекцией, значительную роль играют иммунопатологические процессы, касающиеся изменений как местного иммунитета на уровне желудочно-кишечного тракта, так и системного иммунного ответа. Персистирование Н. pylori в организме приводит к иммунопатологическим сдвигам, которые по некоторым качественным и количественным параметрам характерны для аутоиммунных процессов [1]. Так при Н.pylori-позитивных язвах желудка и 12-перстной кишки возрастает количество цитотоксических Т-лимфоцитов, выявляются аутоантитела к Н+, K+ АТФ-азе париетальных клеток желудка [2], изменяется соотношение Т-хэлперов в сторону Т-хэлперов 1 типа – Th 1 [3]. Активация Th-1 лимфоцитов сопровождается, в свою очередь, усиленным биосинтезом цитокинов, в частности, – γ-интерферона (ИФН-γ), фактора некроза опухоли - ФНО-α , интерлейкина-2 – ИЛ-2 [4]. Гиперпродукция ИФН-γ активизирует тирозинкиназу и соответственно замедляет процессы сборки клеточного белка, изменяя таким образом метаболизм эпителиальной клетки и приводя в конечном итоге к функциональным нарушениям в деятельности клеточного аппарата, в частности к дисбалансу секреции соляной кислоты и слизи [5]. Усиленный синтез ИНФ-γ стимулирует активность второго класса главного комплекса гистосовместимости (МНС 2), взаимодействие которого с Н. pylori на поверхности эпителиальных клеток активизирует процессы апоптоза в них с последующей, возможной метаплазией эпителия, которая считается предраковой патологией. Увеличение синтеза ФНО-α приводит к цитотоксическому воздействию на собственные клетки, в основе которого лежит угнетение митотических и регенеративных процессов в них .

Определенные изменения при геликобактерной инфекции происходят в
В-клеточном звене иммунитета. Так в крови больных выявляются преимущественно IgA и IgG-антитела, в то время как IgM-антитела не обнаруживаются, что свидетельствует о склонности H. pylori – инфекции к хроническому течению [6].

Не менее актуальна другая проблема, которую затрагивает настоящее исследование, а именно – изучение возможностей коррекции иммунопатологических сдвигов, происходящих в организме при геликобактерной инфекции, которые описаны выше, с помощью медикаментозных и немедикаментозных технологий. В числе последних весьма перспективной является КВЧ-пунктура, как один из эффективных методов воздействия низкоинтенсивного электромагнитного излучения крайне высоких частот на биологически активные точки, обладающий выраженным репаративным и иммунорегулирующим действием. В нашей предыдущей работе [7] приведены материалы, свидетельствующие о существенном положительном влиянии КВЧ-пунктуры на темпы обратного развития клинического симптомокомплекса у больных с Н. pylori – позитивной гастродуоденальной патологией. В работах других авторов [8] так же отмечается положительный эффект
КВЧ-пунктуры на течение заболевания и иммунологические показатели, в частности, на структуру популяции Т-лимфоцитов и IgG-синтезирующую функцию
В-лимфоцитов при Н. pylori – ассоциированной язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Показано,что введение в лечебный комплекс КВЧ-пунктуры наряду с улучшением клинических показателей приводит к восстановлению количества Тh 1 клеток и модуляции функциональных параметров В-клеток.

В задачу данного исследования входило изучение реактивности Т и
В-лимфоцитов, полученных от больных с вышеуказанной патологией, на воздействие митогенов: конканавалина А и овечьей антисыворотки к IgG человека как в острый период заболевания, так и в периоде ранней реконвалесценции на фоне комплексного лечения, включавшего стандартную этиотропную терапию и КВЧ-пунктуру.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Обследованы больные с различными вариантами H. pylori – ассоциированной гастродуоденальной патологии, которые госпитализировались в клинику ННИИЭМ. Функциональная и этиологическая диагностика заболеваний базировалась на использовании стандартных клинико-лабораторных и инструментальных исследований; наряду с этим для более точной расшифровки вида инфекции и установления генотипа H. pylori применено исследование гастродуоденальных биоптатов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), которое осуществлялось сотрудниками лаборатории молекулярно-генетических методов надзора за инфекционными заболеваниями ННИИЭМ (зав. лаб. В. Н. Мазепа).

Определение функциональной активности иммуноцитов проводилось путем анализа реакции клетки на контакт с митогенами: для стимуляции В-лимфоцитов применена овечья антисыворотка к человеческому IgG, для активации
Т-лимфоцитов использован конканавалин – А. Реакция клетки на митоген исследовалась методом люминолзависимой хемилюминисценции (ХЛ) с оценкой индуцированной хемилюминисценции, которая являлась результатом последовательного взаимодействия клетки с люминолом и соответствующим митогеном. Хемилюминисцентный анализ исследуемых проб Т, В-лимфоцитов проводился в биохемилюминометре БХЛ – 06 М с замером светового выхода в виде уровня сигнала (I max) в милливольтах (мВ) за 600 сек.

Для проведения КВЧ-пунктуры использовался аппарат «АМФИТ-02/10-01» по методике, описанной ранее [7]. Сравнительные исследования проведены в двух группах больных: получавших лечение КВЧ-пунктурой (1 группа – 37 пациентов) и без нее (2 группа – 32 пациента).

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Проведенные исследования позволили получить следующие данные. В отношении Т-лимфоцитарной активности, измеренной у больных в периоде обострения заболевания, существенных различий между двумя вышеуказанными группами выявить не удалось. Это подтверждается фактически одинаковым распределением в сравниваемых группах больных с различными I max (табл. 1).

 Таблица 1

Показатели ХЛ Т-лимфоцитов у больных в зависимости от периода

заболевания и проведения КВЧ-пунктуры

Так основная масса пациентов в 1 группе (94,6%) и во 2 группе (90,6 %) имела показатели I max выше 1,0 мВ, причем лица с достаточно высокими цифрами I max – от 2,1 мВ до 8,0 мВ и выше – доминировали в обеих группах, составляя соответственно 62,2 % и 61,5%. Иные соотношения в указанных группах фигурировали при сопоставлении данных, полученных у больных к моменту выписки, то есть в период, когда пациенты 1 группы уже прошли полный курс КВЧ-пунктуры. Совершенно очевидно, как это показано в таблице 1, что в 1 группе произошли значительные перестановки и удельный вес лиц с высокими показателями ХЛ снизился с 62,2 % до 21,7 %, то есть почти в 3 раза. В то же время во 2 группе существенных изменений не отмечено.

Как было показано в нашем предыдущем исследовании [7], КВЧ-пунктура способствует положительной динамике выздоровления, в частности более быстрым темпам обратного развития симптомокомплекса гастродуоденальной патологии: болевого, диспептического, астено-вегетативного синдромов. Аналогичные клинико-иммунологические корреляции с проводимой КВЧ-терапией прослеживались и в настоящем исследовании.

Изменения в функциональной активности В-лимфоцитов, определенной на основании хемилюминисцентного метода до и после проведенной КВЧ-пунктуры, как это представлено в таблице 2, менее значительны.

Так параметры функциональной активности В-лимфоцитов, определенные ХЛ-методом в динамике заболевания, несколько отличались от таковых для Т-клеток. Из таблицы видно, что в разгар заболевания удельный вес больных с низкими цифрами I max (до 1,0 мВ) преобладал в 1 и 2 группах больных (67,5 % и 68,8% соответственно). Вместе с тем, общая тенденция к снижению цифр I max и смещению их на более низкий уровень, выявленная при обследовании больных 1 группы перед выпиской, прослеживалась аналогично ХЛ-исследованию Т-клеток в той же группе.

Таблица 2

Показатели ХЛ В-лимфоцитов у больных в зависимости от периода

заболевания и проведения КВЧ-пунктуры

Таким образом, показатели функциональной активности иммунокомпетентных клеток, особенно Т-лимфоцитов, являются важными маркерами интенсивности иммунореактивных процессов, происходящих в организме человека при геликобактерной инфекции и их оценка, особенно в динамике заболевания и на фоне использования современных немедикаментозных методов лечения, в частности КВЧ-пунктуры, может представить достаточно важную в клинико-диагностическом и патогенетическом плане информацию.

ЛИТЕРАТУРА

1. Sato Y., Sugimura K., Mochizuki T. et al. Regional differences on production of chemokines in gastric mucosa between Helicobacter pylori – positive duodenal ulcer and gastric ulcer. Dig. Dis. Sci. 1999. Vol. 44. pp. 2390-2396.

2. Appelmelk B.J., Faller G., Claeys D. et al. Bugs on trial: case of Helicobacter pylori and autoimmunity. Immunol. Today. 1998. Vol. 19, pp.296-299.

3. Harris P.R., Smith P.D. The role of the mononuclear phagocyte in H. pylori – associated infection // The immunobiology of H.pylori: from pathogenesis to prevention. Eds. P.V. Ernst, P. Michetti, P.D. Smith. Philadelphia. New York. 1997. pp. 127-138.

4. Kuo C.T., Leiden J.M. Transcriptional regulation of T-lymphocyte development and function. Ann. Rev. Immun. 1999. Vol. 17. pp. 149-187.

 Suerbaum S., Michetti P. Helicobacter pylori Infection. New Engl. J. Med. 2002. Vol. 347. № 15. pp. 1175-1186.

5. Futagami S., Traghashi H., Norose Y., Kobayashi M. Systemic and local immune responses against Helicobacter pylori urease in patients with chronic gastritis: distinct IgA and IgG positive sites. Gut. 1998. Vol. 43. pp. 168-175.

6. Бокарев А. А., Ефимов Е. И., Денисова Е. В. Применение КВЧ-терапии в лечебном комплексе при реабилитации больных с деструктивной гастродуоденальной патологией // Вестник Нижегородского университета им. Н. И. Лобачевского. Серия Биология. Вып. 2 (4). 2001. C. 75-77.

7. Вознесенская О. А. КВЧ-пунктура в лечении язвенной болезни: клинико-функциональные и иммунологические аспекты // Автореф. дисс. к.м.н. Москва. 2000.