Т. А. Арсланов, Г. В. Чернова
Калужский государственный педагогический университет им. К.Э.Циолковского
М. А. Каплан
Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск
Вестник Нижегородского университета им. Лобачевского. Серия Биология. Выпуск 1(6). Электромагнитные поля и излучения в биологии и медицине. Н.Новгород: Изд-во ННГУ, 2003. С.60-68.
В работе представлены результаты исследования по влиянию ЭМИ КВЧ на содержание РНК в имаго потомства Drosophila melanogaster. Полученные данные подтверждают чувствительность РНК – связанных систем к ЭМИ КВЧ, причем у особей с различными мутациями ответная реакция имеет разную направленность. Особи, облученные на более ранней стадии в большей степени подвержены действию ЭМИ КВЧ в отношении изменения содержания РНК, выразившихся в снижении данного показателя. Эффективность воздействия зависит от стадии онтогенеза, а также от поведенческого статуса.
ВВЕДЕНИЕ
Анализ представленных в литературе данных об использовании ЭМИ КВЧ в биологических исследованиях [1-4], показывает на расширение методов и привлечение новых объектов, свойства и особенности которых позволяют в большей мере изучать биоэффективность данного физического агента.
Объектами такого изучения являются как беспозвоночные [5-8] так и позвоночные [3,4]; среди изучаемых признаков можно выделить ход онтогенеза, способность к регенерации, массу тела и т.д.
В то же время, недостаточно данных, которые бы характеризовали эффективность ЭМИ КВЧ в плане вскрытия механизмов, по которым происходит цепь изменений в биологическом объекте.
В данной работе представлены данные, анализ которых, по нашему мнению, позволит продвинуться в обозначенном направлении. Для этого необходимо было охарактеризовать биоэффективность ЭМИ КВЧ в отношении содержания РНК в объекте и установить значения изменений в функциональной активности последнего при использовании различных доз нетепловой интенсивности.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования служила Drosophila melanogaster (Drosophilidae, Diptera) следующих линий: Д-32 «дикий тип» (норма), низкомутабельная линия; особи которой характеризуются следующим фенотипом: серое тело, красные глаза, нормальные крылья (Смирнова с соавт., [1]); bcnvg – black (II, 48,5), фенотип – чёрное тело; cinnabar (II, 57.5), фенотип – киноварные глаза; vestigiral (II, 67,0), фенотип – зачаточные крылья, несколько замедлен метаморфоз; yellow (I, 0,0), фенотип – жёлтый цвет тела, ротовой аппарат личинки коричневый (Медведев, 1966 [9]; Lindsley et al., [10]).
При изучении влияния ЭМИ КВЧ на содержание РНК в имаго потомства экспериментальные группы формировались из особей, находящихся на 10 стадии эмбрионального развития и личинок, достигших 3 личиночного возраста, полученных по (Мыльников, 1991 [11]) линий Д-32, bcnvg и yellow.
Особи разводились в популяционных сосудах в термостатах при
температуре 24,0°С на стандартной
агаровой среде [9]: вода – 500 мл, изюм – 20 г, манная крупа – 22,5 г, агар-агар
– 4,5 г, дрожжи (сырая масса) – 40 г, пропионовая кислота –
2 мл, пенициллин – 50 000 единиц.
Перед помещением среды в специальные сосуды проводилось её тестирование по рН-показателю (составлял в среднем 6.5). Разливали среду по предварительно простерилизованным сосудам с высотой слоя 1,5 см.
После откладывания яиц, имаго пересаживались на новую среду. В популяционных сосудах развитие шло до поздней стадии четвертого личиночного возраста. Затем проводилось промывание личинок от среды раствором сахарозы. Далее личинки экспонировались при различных временных режимах облучения от 0.5 до 30 мин. В дальнейшем, личинки по 25 шт. переносились в сосуды с фильтровальной бумагой, где в течение суток окукливались. Во всех экспериментах одновременно с опытным проводилось контрольное исследование по аналогичным схемам.
В исследованиях применялся портативный медицинский аппарат
КВЧ-терапии шумовым излучением «АМФИТ-0,2/10-01» [12], производимый ООО «ФизТех»
г. Нижний Новгород.
Как указано в [13,14], на частотах f > 300 МГц зона индукции расположена в непосредственной близости у излучателя и ППМ или интенсивность излучения определяется следующим выражением: ППМ (I) = PизлG/4·H·R2 ·L, где Pизл — мощность, излучаемая антенной, G – коэффициент направленного действия антенны, или коэффициент усиления транзистора по мощности, равный у данного аппарата интегральному значению от 20 до 50 дБ при кТ0, R – расстояние от рупора до объекта, L – затухание ЭМИ на пути распространения.
При плотности потока мощности равной 2,019 мкВт/см2,
доза, поглощаемая биообъектом при такой интенсивности излучения будет равна: W =
I · t/S, где
T – время облучения (секунды), S – площадь экспонируемой поверхности, I –
интенсивность облучения.
Соответственно режимам облучения соответствовали следующие дозы (табл. 1):
Таблица 1
Зависимость дозы от времени экспозиции
|
Время облучения |
Доза облучения |
|
0,5 минут 1 минута 5 минут 10 минут 15 минут 30 минут 60 минут 100 минут |
0,030285 ·10–3Дж/см2 0,06057 · 10–3Дж/см2 0,30285 · 10–3Дж/см2 0,6057 · 10–3Дж/см2 0,90855 · 10–3Дж/см2 1,8171 · 10–3Дж/см2 3,6342 · 10–3Дж/см2 6,057 · 10–3Дж/см2 |
Определение общего содержания РНК производилось по методу Шмидта-Тангаузена с использованием двухволновой спектрофотометрии [15,16]. Метод основан на отделении РНК от ДНК путём мягкого щелочного гидролиза РНК, к которому ДНК более устойчива, и оставалась в осадке.
Затем производилось измерение специфического поглощения нуклеиновыми кислотами у/ф-лучей за счёт содержания в РНК азотистых оснований. Для удаления лишних веществ материал тщательно измельчался в условиях, обеспечивающих ингибирование нуклеаз. Затем из него последовательно извлекали кислотрастворимую фракцию фосфорсодержащих соединений обработкой разбавленным раствором хлорной кислоты (HClO4) и липидную фракцию – органическими растворителями. Затем производилось разделение нуклеиновых кислот на ДНК и РНК гидролизом в определённых условиях.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В ходе исследований использовались следующие подходы.
При экспонировании объекта на
10 стадии эмбрионального развития использовались три линии
Drosophila
melanogaster:
одна дикого типа (Д-32) и две –
мутантные (bcnvg
и yellow).
Особи экспонировались 15 минут (доза
составила 0,90855·10–3 Дж/см2);
30 минут (1,8171·10–3 Дж/см2)
и в течение часа (3,6342·10–3
Дж/см2).
|
Время облучения, минут |
Доза облучения, Дж/см2 ´10–3 |
Содержание РНК в мг/г массы объекта |
||||||
|
Линии |
||||||||
|
yellow |
Д-32 |
bcnvg |
||||||
|
самки |
самцы |
самки |
самцы |
самки |
самцы |
|||
|
15
30
60
контроль |
0,90855
1,8171
3,6342
0 |
0,9026±0,054 10,2 ± 0,034
1,33551±0,087* 15,7 ± 0,65
** 1,4977±0,045 17 ± 0,25
8,81699±0,086
|
1,2713±0,047 18,7 ± 0,34
** 2,8475±0,074 44,7 ± 0,54
** 1,4977±0,087 25,5 ± 0,74
4,1207±0,045 |
1,833±0,024 15,1 ± 0,65
** 8,9526±0,54 101,5 ± 0,53
** 2,457±0,35 28 ± 0,47
8,7554±0,05 |
0,6912±0,045 17,6 ± 0,35
* 0,8411±0,024 20,7 ± 0,34
0,4914±0,045 11,9 ± 0,25
4,7747±0,025 |
** 4,7242±0,057 61,1 ± 0,38
** 5,1284±0,074 66,3 ± 0,36
** 8,754±0,087 110,5 ± 0,74
7,7368±0,068 |
** 4,5979±0,089 157,6 ±0,87
** 6,189±0,078 212,2 ±2,14
6,354±0,078 258,6 ± 3,45
2,9179±0,025 |
|
Примечание: * здесь и в других таблицах данные представлены в виде значения над чертой – средней арифметической и её ошибки и под чертой – % опыта к контролю с его статистической ошибкой. Различия между опытными и контрольными показателями достоверны при: * – p < 0,05; ** – p < 0,01; *** – p < 0,001.
Как видно из табл. 2, наибольший негативный эффект воздействия ЭМИ КВЧ наблюдался у мутантной линии yellow. Достоверное уменьшение содержания РНК на единицу массы особи имеет место при дозе в 1,8171·10–3 Дж/см2 у самцов (на 55,3% при p < 0,01) и дозе 3,6342·10–3 Дж/см2 у обоих полов: соответственно у самок на 83 % и у самцов на 74,5 % при p < 0,01.
У особей мутантной линии bcnvg в группе самок наблюдался рост показателя который отразился на уменьшении различий по отношению к контрольным значениям от 38,9 % (p < 0,01) при 15-тиминутной экспозиции, до возникновения положительного эффекта при дозе 3,6342·10–3 Дж/см2 , состоящего в превышении контрольных значений на 10,5 % (p < 0,01).
Более значимые данные можно наблюдать у самцов этой линии, которые проявились в том, что экспозиционная доза 0,90855·10–3 Дж/см2 привела к превышению контрольных показателей изучаемого биохимического признака на 57,6 % при p < 0,01, увеличение дозы до 1,8171·10–3 Дж/см2 вызвало достоверное отклонение от контрольных значений на 112,2 % при том же уровне значимости.
В линии дикого типа, напротив, наблюдается снижение показателя содержания РНК в объекте при увеличении времени экспозиции: у самок до 72 %-го отклонения при дозе 3,6342·10–3 Дж/см2 (p < 0,01).
Как отмечено в [15], у самок наблюдается повышение содержания РНК, так как у взрослых особей наиболее активным является в синтезе РНК яичник, у самцов же семявыводящая луковица синтезирует РНК в меньшем количестве.
Несмотря на имеющиеся данные об увеличении биосинтеза белка при воздействии неблагоприятных факторов [17], такую зависимость мы можем отметить лишь у линии bcnvg.
По данным научной литературы, уровень метаболических процессов на каждом определённом этапе развития оказывает значительное влияние на характер проявления того или иного биоэффекта ЭМИ в ходе онтогенеза [15,18]. Вероятно, воздействие ЭМИ КВЧ на 10 стадии эмбрионального развития привело к изменению механизмов, влияющих на формирование процессов энергетического и пластического обмена.
Анализ данных табл. 3 подтверждает неоднородность ответной реакции особей линии Д-32 с различным фенотипическим статусом (Бродский, 1988 [19]).
При этом одним из контрольных признаков в нашем исследовании была двигательная активность. Она оценивалась по проявлению функционирования мышц в праксисе позы (тип сложения крыльев при наркотизации с наложением правого или левого крыла).
Так, наблюдаются различия в зависимости содержания РНК у «правокрылых» и «левокрылых» самок: отклонение от контрольных значений у первых уменьшается с возрастанием дозы от 0,0605·10–3 Дж/см2 до 0,605·10–3 Дж/см2, затем имеет место увеличение отклонений, сменяемое возникновением позитивного эффекта при 100-минутной экспозиции. У вторых имеет место закономерное увеличение отклонений от контроля при возрастании дозы.
В противоположной по половому признаку группе также имеются различия в ответной реакции: у «правокрылых» самцов при десятикратном увеличении дозы наблюдается ингибирующее действие ЭМИ КВЧ (от 1 до 10 минут), затем имеет место положительный эффект воздействия при времени экспозиции 30 минут – превышение на 27,1 % при p < 0,01; у другой феногруппы также наблюдается достоверно (p < 0,01) пониженное значение содержания РНК при 10 минутах облучения на 49,3 %.
|
Время облучения, минут
|
Доза облучения, Дж/см2 X10-3 |
Содержание РНК в мг/г массы объекта |
||||||
|
Д-32 |
||||||||
|
правокрылые |
левокрылые |
Всего |
||||||
|
самки |
самцы |
самки |
самцы |
самки |
самцы |
|||
|
1
10
30
100
контроль |
0,0605
0,6057
1,8171
6,057
0 |
** 3,12059±0,094 59,85 ± 0,89
** 3,98993±0,085 76,5 ± 0,65
3,2539±0,075 62,4 ± 0,57
** 5,2845±0,045 107,9 ± 0,85
5,041±0,036 |
** 3,6729±0,083 72,9 ± 0,54
** 3,4484±0,054 68,4 ± 0,36
** 6,9478±0,047 127,1 ± 0,27
4,1519±0,58 85,6 ± 0,25
5,3053±0,041 |
*** 4,0168±0,075 77,1 ± 0,82
* 3,5487±0,084 70,3 ± 0,56
** 2,9546±0,052 55,1 ± 0,84
* 1,8828±0,026 36,1 ± 0,58
5,2156±0,024 |
1,8654±0,078 36,4 ± 0,74
*** 2,9178±0,053 50,7 ± 0,35
1,8237±0,035 36,2 ± 0,54
2,792±0,045 55,4 ± 0,74
5,0398±0,035 |
** 3,5687±0,084 68,5 ± 0,84
** 3,7693±0,084 73,4 ± 0,58
*** 2,5388±0,062 58,7 ± 0,65
** 3,5836±0,031 77,6 ± 0,66
5,1283±0,03 |
* 2,7692±0,080 54,65 ± 0,68
* 3,1831±0,053 59,55 ± 0,36
4,3858±0,039 81,6 ± 0,4
3,472±0,048 50,5 ± 0,74
5,1726±0,038 |
|
Как видно из таблицы 4, изменение стадии, на которой проводится облучение ЭМИ КВЧ, повлияло на распределение ответных реакций особей линии Д-32 как непосредственно экспонировавшихся, так и их потомков.
В группе самок родительских особей величина отклонений от контрольных значений несколько снижается от времени облучения 0,5 минут до экспозиции в 10 минут, затем происходит нарастание, сменяемое уменьшением.
Среди самцов при дозе в 0,0303·10–3 Дж/см2 происходит достоверное увеличение показателя содержания РНК в теле имаго на 11,2 % по отношению к контролю. Двухсоткратное увеличение дозы вызывает уменьшение значений и имеет место отрицательный эффект – параметр снижен на 49,5 % при p < 0,01.
Анализ особей первого поколения подтверждает данные о наличии пролонгированных отрицательных эффектов воздействия ЭМИ КВЧ: при всех дозах показатель снижен в разной степени у обоих полов. Эта тенденция продолжается во втором поколении потомков, однако в группе самцов время экспозиции 10 минут провоцирует достоверное повышение содержания РНК по отношению к контрольным значениям на 15,3 % при p < 0,01.
Таблица 4
|
Время облучения, минут |
Доза облучения, Дж/см2 ´10-3 |
Содержание РНК в мг/г массы объекта |
||||||
|
Д-32 |
||||||||
|
PP |
F 1 |
F 2 |
||||||
|
самки |
самцы |
самки |
самцы |
самки |
самцы |
|||
|
0,5
1
5
10
30
100
контроль |
0,0303
0,06057
0,30285
0,6057
1,8171
6,057 |
** 2,1221±0,035 50 ± 0,58
* 2,8924±0,025 68,5 ± 0,35
** 2, 929±0,036 72,9 ± 0,74
** 3,136±0,029 73,4 ± 0,84
** 2,4912±0,028 58,7 ± 0,54
*** 3,2935±0,016 77,6 ± 0,36
4,2442±0,036 |
*** 5,368±0,025 111,2 ± 0,78
2,6381±0,032 54,65 ± 0,74
** 3,3839±0,062 70,1 ± 0,72
2,8747±0,014 59,55 ± 0,63
* 3,9391±0,045 81,6 ± 0,25
** 2,4378±0,42 50,5 ±0,71
4,8273±0,074 |
** 2,4758±0,023 34,35 ± 0,86
* 2,6526±0,085 36,7 ± 0,84
** 2,99 ± 0,075 31,9 ± 0,87
1,2442±0,087 17,7 ± 0,26
9,3730±0,074 |
** 4,8808±0,065 84,87 ± 0,35
** 2,2547±0,078 39,1 ± 0,86
1,0105±0,084 17,6 ± 0,47
* 1,7684±0,063 30,8 ± 0,82
5,7415±0,068 |
2,6061±0,053 36,1 ± 0,36
** 4,0585±0,087 56,23 ± 0,38
* 5,2842±0,038 73,13 ± 0,24
*** 4,9516±0,076 68,6 ± 0,74
7,2257±0,059 |
** 3,4661±0,058 60,35 ± 0,54
2,4051±0,067 41,9 ± 0,83
** 6,6316±0,027 115,3±0,26
* 4,0721±0,029 70,8 ± 0,86
5,7516±0,068 |
|
Таким образом, при анализе эффективности ЭМИ КВЧ во время экспозиции биологического объекта на разных стадиях онтогенеза можно говорить о наличии зависимости ответной реакции от генетического состава, принадлежности к фенотипической группе, половых различиях и о пролонгированном эффекте.
Полученные данные косвенно подтверждаются литературными: например, авторы [20] указывают на генетическую обусловленность нейроэндокринной реакции у дрозофилы на стрессовые воздействия, в том числе при экспозиции ЭМИ КВЧ. При этом отмечается повышение содержания дофамина, снижение активности тирозиндекарбоксилазы и снижение уровня деградации ювенильного гормона, что оказывает опосредованное влияние на онтогенез и формирование морфоструктур при метаморфозе.
При возрастных изменениях, происходящих в организме имаго, дрозофилы установлено изменение интенсивности перекисного окисления липидов, как у различных линий, так и у отдельных особей одной и той же линии [1]. Таким образом, биохимические особенности обмена веществ подвержены как детерминирующим воздействиям со стороны генома, так и со стороны факторов окружающей среды.
Особенности характеристики белков центральной нервной системы различных линии Drosophila melanogaster, подвергшихся селекции на изменение уровня двигательной активности, позволяют говорить о специфических взаимодействиях в системе развивающейся личинки. Возникающий комплекс «мозг – вентральный ганглий» функционирует благодаря синтезу и активированию нескольких специфических протеинов [21]. Это влияет как на функционирование нервной системы имаго, так и двигательную активность. Автором отмечено повышенное содержание одних пептидов и пониженное содержание других в линиях с высокой и низкой двигательной активностью.
В то же время фенотипическое проявление мутаций, затрагивающих формирование крыла обладает свойствами флуктуирующей асимметрии [22].
Это в целом соотносится с полученными нами результатами. Генетическая разнородность экспонировавшегося биологического материала обуславливает различия в ответной реакции: одни и те же дозы способны вызвать асимметричный эффект при облучении особей на равнозначной стадии онтогенеза, – так, например, расхождение по модулю в ответной реакции у линий bcnvg и yellow. Однозначную зависимость от дозы , таким образом, отметить не представляется возможным.
В то же время, наличие расхождений по признаку содержания РНК в массе объекта у особей с различным фенотипическим статусом, принадлежащим к линии Д-32, указывает на однозначное влияние со стороны используемого агента в отношении изменения физиологических обменных процессов. При этом однородная группа способна проявлять всеобщую негативную зависимость от дозы, увеличивая отклонение от контрольных значений.
Это можно соотнести с данными, указывающими на изменение пролиферативной активности ядерного аппарата: показано увеличение биоэлектрической активности ядер при воздействии ЭМИ КВЧ на клеточном уровне у Drosophila melanogaster, которое проявилось в возрастании репродуктивности при облучении КВЧ на стадии личинки у обоих полов как среди родительских особей, так и в первом поколении. Автором отмечается увеличение теплостойкости, увеличение приспособленности на уровне откладки яиц, возрастание скорости биосинтеза белков.
В нашем случае, возможно, ЭМИ оказалось способно подстраиваться под резонирующие частоты используемого биологического объекта. На это указывают различия в проявлении биологического эффекта, наблюдавшегося в наших опытных группах, получивших дозы облучения, отличающиеся от тепловых.
Неоднозначность проявления эффектов воздействия ЭМИ КВЧ на самых различных уровнях, характеризующих множественность свойств и особенностей Drosophila melanogaster, доказывает специфичность проявлений ответных реакций.
Подводя итог вышеописанному обсуждению полученных результатов, можно утверждать, что в целом ответные реакции биологического объекта, используемого нами в качестве модели, мало зависят от дозового компонента действующего излучения. Энергия, подводимая со стороны КВЧ-излучения слишком мала, чтобы непосредственно реализовать изменения в геноме Drosophila melanogaster или изменить метаболизм биологического объекта.
В то же время значительное отклонение от контрольных значений по содержанию РНК в массе объекта указывает на острорезонансный характер биологического эффекта ЭМИ КВЧ шумового вида с плавающими частотами. Эффект имеет больший знак при воздействии на те структуры, биосинтетическая активность в которых достаточно велика, при этом могут наблюдаться пролонгированные эффекты по всем исследуемым параметрам.
ВЫВОДЫ
1. Полученные данные подтверждают чувствительность РНК – связанных систем к используемому физическому агенту, при этом нами отмечено, что у особей с различными мутациями ответная реакция имеет разную направленность.
2. Особи, облучённые на более ранней стадии в большей степени подвержены действию ЭМИ КВЧ в отношении изменения содержания РНК, выразившихся в снижении данного показателя.
3. Эффективность использования агента зависит от стадии онтогенеза, на которой производится экспонирование материала а так же от индивидуальных особенностей (например, поведенческого статуса).
4. Прямой дозовой зависимости при использовании ЭМИ КВЧ не наблюдается, однако наиболее эффективными были дозы 0,90855·10–3, 1,51425·10–3, 1,8171·10–3 Дж/см2.
5. Данный вид излучения вызывает пролонгированные эффекты у Drosophila melanogaster, исследованных в данной работе.
ЛИТЕРАТУРА
1. Смирнова А. Н. Изучение генетической детерминации интенсивности перекисного окисления липидов в связи с различиями в продолжительности жизни Drosophila melanogaster. Автореф. дисс. на соиск. уч. 2000.
2. Катаев А. А., Александров А. А., Тихонова Л. И., Берестовский Г. Н. Частотозависимое влияние миллиметровых электромагнитных волн на ионные токи водоросли Nitellopsis. Нетепловые эффекты // Биофизика. 1993. Т.38. С. 446-462.
3. Гапеев А. Б., Сафронова В. Г., Чемерис Н. К., Фесенко Е. Е. Модификация активности перитонеальных нейтрофилов мыши при воздействии миллиметровых волн в ближней и дальней зоне излучателя // Биофизика. 1996. Т. 41. № 1. С. 205-219.
4.
Шарихин В. Ф., Федоров В. А., Перевозчиков Н. Ф., Бурлаков А. Б.
Влияние миллиметрового излучения на эмбриональное развитие вьюна
Misgurnus fossilis L
.// В сб.: Электромагнитные излучения в биологии. Труды межд. конф.
– Калуга: Изд-во КГПУ им. К. Э. Циолковского. 2000. С. 193-196.
5. Чернова Г. В., Каплан М. А., Арсланов Т.А. Изменения морфофизиологических показателей Drosophila melanogaster при воздействии КВЧ – излучения при различных временных режимах // Вестник Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского Сер. Биология. Вып. 2(4). Миллиметровые волны в биологии и медицине. – Н. Новгород: Изд-во ННГУ. 2001. С. 57-61.
6. Чернова Г. В., Каплан М. А., Арсланов Т.А. Некоторые особенности реагирования модельных объектов на ЭМИ КВЧ ММ-диапазона // Изучение природы бассейна реки Оки. Тез. докл. межрегион. научн.-практич. конф. «Река Ока-третье тысячелетие». – Калуга: Изд-во КГПУ. 2001. С. 214-218.
7. Арсланов Т. А. Чернова Г. В. Каплан М. А. Характер изменений некоторых популяционных показателей Drosophila melanogaster в зависимости от особенностей поведения под влиянием ЭМИ КВЧ мм-диапазона // В сб.: Неионизирующие электромагнитные излучения в биологии и медицине (БИО-ЭМИ): Труды межд. конференции. – Калуга: Изд-во КГПУ. С. 47-54.
8. Арсланов Т. А., Чернова Г. В., Каплан М. А. К вопросу о биоэффективности ЭМИ КВЧ мм-диапазона для морфофизиологических характеристик Drosophila melanogaster с различным поведенческим статусом // В сб.: Неионизирующие электромагнитные излучения в биологии и медицине (БИО-ЭМИ) Труды межд. конференции. – Калуга: Изд-во КГПУ. С. 54-59.
9. Медведев Н. Н. Практическая генетика. – М.: Наука. 1966. 237 с.
10. Lindsley D. L. Grell F. Y. Genetic Variations of Drosophila melanogaster. – Carnegie Inst. Wash. Publ. 1968. No 627. 472 p.
11. Мыльников С. В. Динамика эмбриональной смертности в инбредных линиях дрозофилы // Онтогенез. 1991 . Т.22. № 1. С. 93-95.
12. Аппарат КВЧ-терапии шумовым излучением «АМФИТ-0,2/10-01». Н. Новгород.: ООО «ФизТех». 1997. 21 с.
13. Исмаилов Э.Ш. Биофизическое действие СВЧ-излучений. – М.: Энергоатомиздат. 1987. 144 с.
14. Янсен Й. Курс цифровой электроники Т.1. - М.: Мир. 1987. 345 c.
15. Алёшина Т. Е. Индуцированные низкоинтенсивным импульсным лазерным излучением морфофизиологические и биохимические изменения в процессе развития организма. Автореф. дисс на соиск. уч. степени канд. биол. наук. Калуга. 2001. 23 с.
16. Филиппович Ю. Б. Практикум по общей биохимии: Учебное пособие для студ. хим. спец. – М.: Просв. 1982. 311 с.
17. Хлебодарова Т. М. Анкилова И. А. Грунтенко И. Ю. и др. Нарушения в стресс - реакции Drosophila melanogaster коррелируют с изменением в хит-шок-ответе // ДАН. 1998. Т. 391. №2. С. 274-286.
18. Кару Т. Й. О молекулярном механизме терапевтического действия излучения низкоинтенсивного лазерного света // ДАН. 1986. Т. 291. № 5. С. 1245-1249.
19. Бродский А. К. Механика полёта насекомых и эволюция крылового аппарата. – Л.: Наука. 1988. 132 с.
20. Васенкова И. А. Анализ взаимосвязи клеточного и нейроэндокринного ответов на стресс у дрозофилы. - Автореф. дисс. на соиск. уч. степени канд. биол. наук. Новосибирск. 2000. 17 с.
21. Адоньева Н. В. Характеристика белков центральной нервной системы в линиях Drosophila melanogaster, селектированных на изменение уровня двигательной активности... Автореф. дисс. на соиск. уч. степени канд. биол. наук. Новосибирск. 2000. 15 с.
22. Козерецька I. А. Нейрогеннiй локус Delta та особливостi генетичних взаэмодiй при формуванi крила у Drosophila melanogaster. Автореф. дисс. на зд. наук. ступ. к.б.н. Киiв. 2000. 23 рр.